欢迎来到 阿仪网

免费注册

手机网投体验金大全 | 产品 | 求购 | 资讯 | 专题 | 找厂商 | 打听 | 人才 | 品牌 | 资料 | 技术文献 | 展会 | 耗材 | 配件 | 新品 | 促销 | 书籍 | 招标 | 优质仪器
广告

您的位置: 手机网投体验金大全 >技术文献 >产品说明 >鸡胰岛素(INS)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书

鸡胰岛素(INS)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书

提供者:上海科顺生物科技手机网投体验金大全   发布时间:2020/6/28  阅读次数:12次   进入该公司展台

鸡胰岛素INS酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定鸡血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中胰岛素(INS)的含量。

 

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本鸡胰岛素(INS)水平。用纯化的鸡胰岛素(INS)捕获抗体包被微孔板,制成固相体,往包被的微孔中依次加入鸡胰岛素(INS),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品鸡胰岛素(INS)含量

 

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1个

1个

 

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品

0。3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶标试剂

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

终止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×浓缩洗涤液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:标准品浓度依次为:4824、12、6、3、0 mU/L.

 

样本处理及要求

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4。 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7。2-7。4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6。 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

操作步骤

1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

2。 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外

4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

7。 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 

8. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

9。 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10。 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

 

 

 


计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,    

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD      

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释      

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标      

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值      

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释      

倍数,即为样品的实际浓度。                  

 

                                              

 

(此图仅供参考)

 

 

 

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。

 

检测范围:                                              

1.5 mU/L - 48 mU/L

 

灵敏度:                                              

最低检测浓度小于0.1 mU/L

 

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存: 2-8。

2.有效期: 6个月

优质商品

X射线荧光光谱仪
X射线荧光光谱仪

版权声明

凡本网注明"来源:阿仪网"的所有作品,版权均属于阿仪网,未经本网授权不得转载、摘编或利 用其它方式使用。已获本网授 权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:阿仪网"。违者本网将追究相关法律责任。

本信息由注册会员:上海科顺生物科技手机网投体验金大全发布并且负责版权等法律责任。

旗下频道

色谱仪 光谱仪 反应釜 试验箱 试验机 搅拌器 培养箱 离心机 水分测定 气体检测 量热仪 石油仪器 纯水器 比表面仪 温度记录 流量计 万用表 显微镜 粒度仪 测厚仪 硬度计 酸度计 元素分析 生物试剂 电线电缆 天平衡器 传感器 食品检测 压力仪表 电化学 测厚仪 阀门仪表 电力仪表 干燥设备 药物检测
迪士尼彩乐园开户 喵彩彩票注册 网上赌场真的吗 真人网络娱乐 拉斯维加斯赌场 518彩票开户 波音时时彩平台 平安彩票网站 99棋牌 澳门老葡京赌场